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时间:2025-09-01 04:46:54 来源:网络整理 编辑:热点
白芷为伞形科植物白芷AngelicadahuricaFisch.exHoffm.)Benth.etHook.f.或杭白芷AngelicadahuricaFisch.exHoffm.)Benth.etH
白芷为伞形科植物白芷Angelicadahurica(Fisch.exHoffm.)Benth.etHook.f.或杭白芷Angelicadahurica(Fisch.exHoffm.)Benth.etHook.f.var.formosana(Boiss.)ShanetYuan的面法干燥根。白芷中含有香豆素类、优化油提艺及氧化研究挥发油、白芷多糖类、挥发活性黄酮类等多种有效成分,取工其抗具有解表散寒、面法祛风止痛、优化油提艺及氧化研究宣通鼻窍、白芷燥湿止带、挥发活性消肿排脓的取工其抗功效。现代研究表明,面法其具有抑制黑色素、优化油提艺及氧化研究抗氧化、白芷镇痛、挥发活性抗炎、取工其抗抗过敏等药理作用,在临床应用广泛。白芷具有抑制黑色素的作用和抗氧化作用,可作为美白化妆品的原料。由于白芷无毒且香气浓郁,也常作为肉类制作的调味品,可除去牛羊肉的膻味。挥发油作为白芷的有效成分之一,是其作为药品和调味品的重要活性成分。
提取挥发油的一般方法有压榨法、溶剂提取法、水蒸气蒸馏法和超临界CO2萃取法等。考虑到药品和食品的安全性和操作的可行性,在前期研究的基础上,白芷挥发油的提取选用水蒸气蒸馏法,该法操作简便、溶剂安全易得,并采用Box-Behnken设计响应面法优选白芷挥发油的提取工艺,克服了正交试验精度不够的缺点。同时,通过体外抗氧化试验测定白芷挥发油对羟自由基清除率和DPPH自由基清除率,考察其体外抗氧化能力,为白芷产品的综合开发提供参考依据。
白芷(购于北京同仁堂药店),其产地为四川,经鉴定为白芷为伞形科植物白芷Angelicadahurica(Fisch.exHoffm.)Benth.etHook.f的干燥根。其质量标准均符合《中国药典》(2020版)的各项规定。抗坏血酸标准品(天津市科密欧化学试剂有限公司),DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼,AR,合肥巴斯夫生物科技有限公司),无水乙醇,无水硫酸钠,硫酸亚铁,水杨酸,过氧化氢均为分析纯,实验用水为实验室自制蒸馏水。
FA20413分析天平(上海精密科学仪器有限公司),WF111710-849万能粉碎机(江阴市万通药化机械设备有限公司),JB挥发油测定仪(常州普天仪器制造有限公司),T6型紫外-可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司)。
取干燥后经粉碎成一定粒度的白芷粉末50.0g,置于2000mL的圆底烧瓶中,加入一定量蒸馏水,浸泡一定时间,采用水蒸气蒸馏法提取白芷挥发油,参照2020版《中国药典》(四部2240挥发油测定法)测定挥发油的体积,记录出油量,经无水硫酸钠干燥后,置于具塞瓶中称重。依据公式计算得油率,得油率(%)=(M1-M2)/M0×100%。其中M1为挥发油和具塞瓶的总质量,M2为具塞瓶的质量,M0为药材粉末质量。
水蒸气蒸馏法提取挥发油的影响因素主要有液料比、浸泡时间、提取时间和粉碎粒度。本实验选取以上4个因素作为单因素试验的考察因素。
液料比A确定:精密称取过50目筛的白芷粉末50.0g,置于2000mL的圆底烧瓶中,浸泡时间为2h、提取时间为3h,考察不同液料比5∶1mL/g、10∶1mL/g、15∶1mL/g、20∶1mL/g、25∶1mL/g对白芷挥发油得率的影响。
浸泡时间B确定:精密称取过50目筛的白芷粉末50.0g,置于2000mL的圆底烧瓶中,液料比为15∶1mL/g,提取时间为3h,考察不同浸泡时间0h、1h、2h、3h、4h对白芷挥发油得率的影响。
提取时间C确定:精密称取过50目筛的白芷粉末50.0g,置于2000mL的圆底烧瓶中,液料比为15∶1mL/g,浸泡时间为2h,考察不同提取时间2h、3h、4h、5h、6h对白芷挥发油得率的影响。
粉碎粒度D确定:精密称取分别过10目、24目、50目、65目、80目筛的白芷粗粉50.0g,置于2000mL的圆底烧瓶中,液料比为15∶1mL/g,浸泡时间为2h,提取时间为3h,考察不同粉碎粒度对白芷挥发油得率的影响。
在单因素试验的基础上,进一步采用BoxBehnken模型设计试验,以液料比(A)、浸泡时间(B)、提取时间(C)、粉碎粒度(D)四个影响因素为自变量,以白芷挥发油得率为响应值Y,进行响应面分析,确定最佳提取工艺条件
BoxBehnken试验因素与水平见表1。
参考马延红等测定挥发油抗氧化活性的方法,并略作改动。取不同量的白芷挥发油至于50mL的容量瓶中。用无水乙醇将样品配制成0.2mg/mL、0.4mg/mL、0.6mg/mL、0.8mg/mL、1.0mg/mL、1.2mg/mL不同浓度的白芷挥发油样品溶液,分别取2.0mL上述样品溶液和2.0mL浓度为0.1mmol/mL的DPPH溶液置于具塞比色管中,混合均匀后放于避光处静置30min后,用紫外分光光度法在波长517nm处测定其吸光度,重复测定三次,取平均值,记为A1;用相同体积的无水乙醇分别代替DPPH溶液和白芷挥发油样品溶液,在相同条件下测定吸光度,分别记为A2和A0。按照公式计算清除率,并以和样品同浓度的抗坏血酸(Vc)对照品溶液作为阳性对照。清除率(%)=[1-(A1-A2)/A0]×100%。
参考罗秋水等清除羟自由基的方法,略有改动。取6支试管,依次加入2.0mL的6mmol/LFeSO4溶液,分别加入浓度为0.2mg/mL、0.4mg/mL、0.6mg/mL、0.8mg/mL、1.0mg/mL、1.2mg/mL的白芷挥发油无水乙醇溶液1.0mL和2.0mL的6mmol/LH2O2溶液,充分振摇后,静置10min,再依次加入2.0mL的6mmol/L的水杨酸乙醇溶液,待混合均匀后,在50℃的水浴中反应30min,并置于波长517nm处测得不同浓度下的白芷挥发油溶液吸光度,平行测定三次,取平均值记为Aa,用1.0mL的无水乙醇代替样品溶液测得空白对照液吸光度A0,用1.0mL无水乙醇代替样品溶液不加显色剂H2O2测得底物的吸光度Ab。按公式计算羟自由基清除率,清除率=[1-(Aa-Ab)/A0]×100%。以和样品同浓度的抗坏血酸(Vc)对照品溶液作为阳性对照。
相关链接:硫酸亚铁,水杨酸,过氧化氢,无水硫酸钠
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